100bp DNA Marker 核酸標記
產品編號 : Bio-100
產品規格 : 500ul/ 支
廠 牌 : Biokit
詳細資料
一、 產品基本資料
產品名稱:100bp 去氧核糖核酸分子量標準品 (100bp DNA Marker / Ladder)
分子量範圍:100 – 3,000 鹼基對 (bp)
條帶組成:內含 13 條精準雙鏈去氧核糖核酸條帶,組成為 100、200、300、400、500、600、700、800、900、1,000、1,500、2,000、3,000 bp。
特殊參考帶:以 500、1,000、1,500、2,000 和 3,000 bp 為加強帶,呈色強度明顯高於其餘條帶,以便當做比對標準。
產品外觀:澄清藍色溶液
包裝規格:500 µL / 支
儲存條件:4°C 短期儲存可維持 3 個月,長期保存務必置於 -20°C。
產品用途:本產品僅限科學研究與實驗室研發使用,不得用於臨床診斷、人體或動物之醫療與食品。
二、 化學與物理性質
化學組成:由質體 DNA 經特定限制酶切或聚合酶鏈鎖反應純化產物精準混合而成,預先溶解於含有甘油、EDTA 及電泳指示染料的緩衝液中。
溶劑系統:即用型配方(Ready-to-Load),專門針對電泳注膠設計,無需額外添加上樣緩衝液即可直接加樣。
酶活性殘留:經嚴格品質控管,無可偵測之脫氧核糖核酸酶與蛋白酶活性,條帶不降解。
三、 核心實驗應用情境
常規分子量核酸電泳大小比對:專為瓊脂糖凝膠電泳設計,用於精準測定常規 PCR 擴增產物、質體限制酶切片段或基因組 DNA 剪切片段的大小。
中短片段與多重條帶分離對照:適用於 1.5% 到 2.0% 的常規瓊脂糖凝膠,能將 100 bp 至 3,000 bp 之間的各個片段清晰分離,並透過五個加強位置快速判定分子量區間。
基因分型與克隆鑑定:在菌落 PCR、質體構建鑑定或基因敲除驗證中,作為穩定可靠的條帶參照。
四、 標準操作步驟
步驟一:試劑回溫與混勻
將產品自 -20°C 取出,於室溫下完全融化。
溫和微量震盪或輕彈管壁混勻,並進行瞬間離心使液體集聚管底。本產品嚴禁加熱或煮沸變性。
步驟二:加樣電泳
專門針對電泳注膠設計,直接使用微量移液管吸取溶液,注入已預備好的凝膠孔中。常規電泳每孔建議上樣量為 5 µL。
如果使用高靈敏度核酸染料進行膠內染色或後染色,可依據成像設備的靈敏度適度減少上樣量至 3 µL,以防條帶過載信號過強。
步驟三:影像擷取
電泳結束後,置於紫外線凝膠成像儀或藍光透射儀下進行觀測與拍照。
五、 核心操作注意事項
嚴禁高溫變性:本產品為高純度雙鏈 DNA 片段,上樣前絕對禁止進行 95°C 煮沸或熱變性處理,高溫會導致雙鏈解鏈,造成電泳條帶出現多重模糊影或異常條帶。
膠體濃度限制:本產品不適用於 0.8% 以下的低濃度瓊脂糖凝膠。在低濃度膠體中,100 bp 到 300 bp 的小片段會因遷移速度過快而無法有效分開,甚至跑出膠外。
防止外源核酸酶污染:吸取時務必配戴無粉手套,並使用乾淨無酶的移液管尖,避免環境中的脫氧核糖核酸酶進入管內引發 DNA 降解。
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2011/10/27 下午 12:10:31
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